1. Добавление образцов: добавьте раствор образца в планшет с покрытием, разведите сыворотку в PBS или физиологическом растворе в соотношении 1:20, а затем добавьте 10 мкл в реакционные лунки микропланшета.

2. Добавление контроля: 3-луночный отрицательный контроль, 1-луночный положительный контроль и 100 мкл контрольной сыворотки.

3. Инкубация: Встряхните реакционную пластину, чтобы хорошо перемешать образец, а затем поместите его в инкубатор при 37°С или водяную баню на 20 минут.

4. Мытье полов: Разбавьте 15 мл моющего раствора до 300 мл дистиллированной водой. При ручном мытье содержимое реакционной пластины следует вылить воздухом и поместить в отверстие, заполненное моющей жидкостью, а затем выдержать 30 с и сильно встряхнуть. Повторите эту операцию 5 раз и выбейте насухо. Машина должна выполнить 5 раз. 200 мкл промывочного раствора можно ввести в каждую лунку или заполнить, затем оставить на 30 минут и промокнуть.

5. Добавьте рабочий раствор, меченный ферментом: добавьте 100 мкл рабочего раствора, меченного ферментом, в каждую лунку инкубатора при 37 ° C и промойте планшет пять раз через 20 минут. Моечная тарелка такая же, как и в шаге 4.

6. Это последняя стадия реакции с развитием окраски и прекращением реакции: в лунку для реакции добавляют 50 мкл субстрата и окрашивание развивается в течение 10 минут в темноте при 37°С. Раствор в каждой лунке останавливали и смешать, чтобы остановить реакцию. Использование микропланшетов следует проводить в стерильных условиях. Тщательно продезинфицируйте и очистите планшеты после использования, но обратите внимание, что для некоторых планшетов необходимо внимательно прочитать инструкции, чтобы узнать, можно ли их стерилизовать при высоких температурах.