1. При определении эндотоксина в крови обратите внимание на подбор методов и реактивов.

2. Приготовление плазмы или сыворотки

В качестве обычного клинического образца плазма является основным образцом, и коэффициент ее использования составляет более 95%. Поэтому очень важно готовить плазму как основную часть жидкости организма. По словам Даса, эндотоксин, как правило, связан с тромбоцитами в дополнение к своему свободному состоянию, поэтому в качестве образца более целесообразно использовать плазму, содержащую большое количество тромбоцитов. При приготовлении плазмы человека или плазмы животных в настоящее время для предотвращения повреждения клеток в зарубежных странах в основном используется низкотемпературное разделение с использованием образцов плазмы, содержащих большое количество тромбоцитов, то есть при 4 ℃ 1000 г x 10 минут условия разделения или 3000 г x 40 секунд в условиях разделения, когда нет низкотемпературной центрифуги. Не допускается проводить скоростную и длительную сепарацию при нормальных температурах. Кроме того, при разделении плазмы или сыворотки следует избегать бактериального загрязнения.

Приготовление сыворотки: используйте шприц без антикоагулянта для сбора крови и переноса ее в центрифужную пробирку и поместите ее в баню с ледяной водой на 30 минут при 4 ℃, 1000xg, 10 минут для центрифугирования.

После отделения плазмы или сыворотки, если они временно не используются, их можно заморозить при -80 ℃ и использовать в течение 1 месяца. Примечание Во избежание адсорбции эндотоксина используйте для хранения стеклянную пробирку.

3. Виды и эффекты антикоагулянтов

Во время приготовления плазмы из-за добавления некоторых антикоагулянтов тип и количество антикоагулянтов оказывают большое влияние на скорость восстановления. Как правило, обычно используемые антикоагулянты в основном включают гепарин, цитрат натрия и ЭДТА, среди которых наиболее широко используется гепарин. Однако мы знаем, что большое количество гепарина будет мешать реакции эндотоксина, особенно для метода нагревания разбавления и метода экстракции хлороформом, что снизит скорость извлечения, но окажет меньшее влияние на метод АКП, поэтому количество добавляемого гепарина и высвобождается во время приготовления плазмы, достаточно всего 2–5 мкл/мл.